Особливості міжгенних та ген-факторних взаємодій у патогенетичних механізмах розвитку алкогольного гепатиту та алкогольного цирозу печінки

Abstract

Мета роботи – проаналізувати комбінації генотипів за генами eNOS (T-786C), PNPLA3 (C10109G), CD-14 (C-159T) у хворих на алкогольну хворобу печінки (АХП). Матеріал і методи. Обстежено 99 пацієнтів із встановленим діагнозом АХП. У 37 (37,37 %) із 99 пацієнтів основної групи було підтверджено за допомогою додаткових лабораторних та інструментальних методів алкогольний гепатит (АГ), а у 62 (62,62%) – алкогольний цироз печінки (АЦП). У 64,86 % пацієнтів з АГ та у 64,51% з АЦП було виявлено гіпертонічну хворобу (ГХ) І-ІІ стадій, I-II ступенів, без серцевої недостатності, тому до групи порівняння із 21 практично здорової особи було також залучено 10 (32,25%) осіб з ГХ. Для визначення поліморфних варіантів генів CD 14 (C-159T), rs2569190 PNPLA3 (C10109G), rs738409 та eNOS (T-786C), rs2070744 використовували модифіковані протоколи з олігонуклеотидними праймерами із застосуванням методу полімеразної ланцюгової реакції та наступним аналізом поліморфізму довжин рестрикційних фрагментів. Висновок. При розрахунку розповсюдження всіх варіантів комбінацій генотипів у хворих на алкогольну хворобу печінки встановлено, що комбінації генотипів ТС/СТ за генами eNOS/CD14 та TС/CT/GG за генами eNOS/CD14/PNPLA3 значуще знижують ризик циротичного ураження печінки, у тому числі у випадку тривалого зловживання алкоголем.

Цель работы – проанализировать комбинации генотипов по генам eNOS (T-786C), PNPLA3 (C10109G), CD-14 (C-159T) у больных алкогольной болезнью печени (АБП). Материал и методы. Обследовано 99 пациентов с установленным диагнозом АБП. В 37 (37,37%) из 99 пациентов основной группы было подтверждено с помощью дополнительных лабораторных и инструментальных методов алкогольный гепатит (АГ), а в 62 (62,62%) – алкогольный цирроз печени (АЦП). В 64,86% пациентов с АГ и в 64,51% с АЦП была обнаружена гипертоническая болезнь (ГБ) I-II стадий I-II степеней, без сердечной недостаточности, поэтому к группе сравнения 21 практически здоровых лиц были также привлечены 10 (32,25%) человек с ГБ. Для определения полиморфных вариантов генов CD 14 (C-159T), rs2569190 PNPLA3 (C10109G), rs738409 и eNOS (T-786C), rs2070744 использовали модифицированные протоколы с олигонуклеотидными праймерами с применением метода полимеразной цепной реакции и последующим анализом полиморфизма длины рестрикционных фрагментов. Вывод. При расчете распространения всех вариантов комбинаций генотипов у больных алкогольной болезнью печени установлено, что комбинации генотипов ТС/СТ по генам eNOS/CD14 и TС/CT/GG по генам eNOS/CD14/PNPLA3 значимо снижают риск цирротического поражения печени, в том числе в случае дли-тельного злоупотребления алкоголем.

Purpose – to analyze the combinations of genotypes for the eNOS (T-786C), PNPLA3 (C10109G), CD-14 (C-159T) genes in patients with alcoholic liver disease. Material and methods. 99 patients with alcoholic liver disease were examined. In 37 (37.37%) of the 99 patients of the main group, alcoholic hepatitis (AG) was confirmed by additional laboratory and instrumental methods, and in 62 (62.62%) – liver cirrhosis (AC). In 64.86% of patients with hypertension and 64.51% of ADCs, hypertensive disease (GC) of І-II stages, stages I-II, without heart failure was detected, therefore 10 (32.25%) patients with HD were also involved in the comparison group of 31 healthy persons. To identify the polymorphic variants of CD14 (C-159T), rs2569190 and PNPLA3 gene (C10109G), rs738409, modified protocols with oligonucleotide primers were used using the PCR method and the subsequent analysis of restriction fragment length polymorphism (PDRF). To determine the eNOS (T-786C), rs2070744 mutation, a protocol with oligonucleotide primers was used using the allelic-specific PCR method. The investigated genes were amplified using specific primers (Metabion, Germany). Specific fragments of CD14 (C-159T), PNPLA3 (C10109G) and eNOS (T-786C) genes were amplified using the commercial DreamTaq Green PCR Master Mix (Thermo Scientific, USA). Conclusion. When calculating the distribution of all variants of combinations of genotypes in subjects involved in the study, it has been found that combinations of TS/CT genotypes by eNOS/CD14 and TC/CT/GG genes for eNOS/CD14/PNPLA3 genes significantly reduce the risk of cirrhotic liver damage, in particular in the case of the prolonged alcohol abuse.