Імуногістохімічне дослідження деяких регуляторів апоптозу в трофобласті хоріальних ворсинок при кальцинозі плаценти в жінок із залізодефіцитною анемією вагітних

Abstract

Мета дослідження – встановити кількісні параметри імуногістохімічного забарвлення на проапоптотичний білок Вах та протиапоптотичний білок Bcl-2 у трофобласті плацент з кальцинозом у жінок із залізодефіцитною анемією вагітних. Матеріал і методи. Досліджено 164 плаценти з кальцинозом, при цьому діагноз ЗДАВ (І-ІІ ступінь тяжкості) виставлено у 84 вагітних, решта спостережень кальцинозу плаценти 80 була без анемії. Окрім того, досліджено 30 плацент фізіологічної вагітності. Для постановки імуногістохімічної методики застосовували первинні антитіла проти проапоптотичного білка Вах та протиапоптотичного білка Bcl-2 (DAKO). Результати дослідження. При врахуванні можливості вертикального гетероморфізму щодо розподілу інтенсивності імуногістохімічного забарвлення на протеїн Вах виявлено, що оптична густина забарвлення в середньому є найменшою в зоні А, а найбільшою – у зоні С, причому слід вказати на те, що такий гетероморфізм відзначався в усіх групах дослідження. Вивчення вертикального гетероморфізму щодо розподілу інтенсивності протиапоптотичного білка Bcl-2 з’ясовано, що оптична густина забарвлення в середньому є найбільшою в зоні А, а найменшою – у зоні С, це відзначалося в усіх групах дослідження з кальцинозом, а для фізіологічної вагітності виявлені відмінності зони С від зон А та В. Висновок. Кальциноз плаценти при залізодефіцитній анемії вагітних порівняно зі спостереженнями без анемії характеризується більшими середніми значеннями оптичної густини забарвлення на протеїн Вах та меншими середніми значеннями оптичної густини забарвлення на протиапоптотичний білок Bcl-2 у трофобласті у всіх зонах плаценти (А, В, С).

Цель исследования – установить количественные параметры иммуногистохимического окрашивания на проапоптотический белок Вах и протиапоптотический белок Вcl-2 в трофобласте плацент с кальцинозом у женщин с железодефицитной анемией беременных. Материал и методы. Исследовано 164 плаценты с кальцинозом, при этом диагноз железодефицитная анемия беременных (І-ІІ степень тяжести) выставлен 84 беременным, остальные наблюдения кальциноза плаценты 80 были без анемии. Кроме того, исследованы 30 плацент физиологической беременности. Для постановки имуногистохимической методики применяли первичные антитела против проапоптотического белка Вах и протиапоптотического белка Вcl-2 (dako). Результаты исследования. При учете возможности вертикального гетероморфизма по распределению интенсивности иммуногистохимического окрашивания протеином Вах выявлено, что оптическая плотность окрашивания в среднем является наименьшей в зоне А, а наибольшей – в зоне С, причем следует указать на то, что гетероморфизм отмечался во всех группах исследования. При изучении вертикального гетероморфизма по распределению интенсивности окрашивания на протиапоптотический белок Вcl-2 установлено, что оптическая плотность окрашивания в среднем является наибольшей в зоне А, а наименьшей – в зоне С, это отмечалось во всех группах исследования с кальцинозом, а для физиологической беременности выявлены различия зоны С от зон А и В. Вывод. Кальциноз плаценты при железодефицитной анемии беременных по сравнению с наблюдениями без анемии характеризуется возростанием средних значений оптической плотности окрашивания протеином Вах и уменьшении средних значений оптической плотности окрашивания на протиапоптотический белок Вcl-2 в трофобласте во всех зонах плаценты (А, В, С).

Objective. To evaluate quantitative parameters of immunohistochemical staining on the proapoptotic protein Bax and the antiapoptotic protein Bcl-2 in the trophoblast of placenta with calcinosis in women with iron deficiency anemia in pregnancy. Material and methods. 164 placentas with calcinosis were studied, while the diagnosis of IDAP (I-II severity level) was established in 84 pregnant women, the rest 80 of the placenta's calcinosis observations were without anemia. In addition, 30 placentae of physiological pregnancy were studied. For the immunohistochemical investigation, primary antibodies against the pro-apoptotic Bax protein and the anti-apoptotic protein Bcl-2 (DAKO) were used. Results of the research. Considering the possibility of vertical heteromorphism for the distribution of the intensity of immunohistochemical staining on the Bax protein, it was found that the optical density of the color in average is the lowest in the zone A, and the highest in the zone C, and it should be pointed out that such heteromorphism was noticed in all study groups. In the study of the vertical heteromorphism accordingly to the distribution of the intensity of the anti-apoptotic protein Bcl-2, it was found that the optical density of the staining is in average the highest in the zone A, and the lowest in the zone C, that was noticed in all groups of the study with calcinosis, and for the physiological pregnancy the differences of the Zone C from zones A and B were revealed. Conclusion. The calcinosis of placenta in iron deficiency anemia in pregnant women compared to non anemia observations is characterized by higher average values of the optical density of staining on the Bax protein and lower average values of the optical density of staining on the anti-apoptotic protein Bcl-2 in trophoblast in all zones of the placenta (A, B, C).